一、细胞基本属性
- 细胞名称：人原代听神经瘤细胞（永生化）
- 细胞别称：永生化听神经瘤细胞；听神经瘤细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：听神经瘤组织（经病理学确诊）
- 永生化方法：SV40大T抗原转染（经多次传代验证遗传稳定性）
- 生长特性：贴壁生长（依赖神经细胞基质胶包被）
- 细胞形态：多角形或梭形，增殖期呈单层致密排列
- 细胞代数：P15 - P30（永生化特性支持长期传代）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：神经细胞专用培养基（含10% FBS+表皮生长因子+神经营养因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖能力：倍增时间约24 - 48小时（连续传代无显著衰减）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预温培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱1小时恢复代谢
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免反复吹打（防止机械损伤）
- 传代后需补充神经生长因子以维持增殖活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞膜稳定剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时内检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：免疫荧光染色确认SV40大T抗原持续表达
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞失活（需提供温度记录证明）
- 72小时内证实微生物污染（需提交污染检测报告）
- 细胞STR鉴定与档案不符
- 复苏存活率低于承诺值（经第三方检测确认）
- 不予重发情形：
- 未按规范进行预包被基质胶导致贴壁失败
- 使用非指定培养基或添加剂引发功能异常
- 液氮保存设备故障导致细胞反复冻融
- 未进行定期支原体检测造成实验污染
