人胰腺肿瘤成纤维细胞永生化

原代细胞永生化

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XM-X06611×10^6原代细胞永生化3500


一、细胞基本属性

细胞名称:人胰腺肿瘤成纤维细胞(永生化)(Human Pancreatic Tumor - associated Fibroblasts (Immortalized))

细胞别称:HPTCF;胰腺癌相关成纤维细胞;肿瘤间质成纤维细胞

种属来源:人(Homo sapiens)

年龄性别:胰腺肿瘤患者(性别不限,供体经病理确认)

组织来源:胰腺肿瘤组织间质部分

生长特性:贴壁生长(永生化处理后稳定增殖)

细胞形态:长梭形或星状不规则,汇合后呈交织网状排列

细胞代数:P15 - P25(永生化后遗传稳定性验证)

细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

培养基:DMEM/F12(含10% FBS+成纤维细胞生长因子添加剂)

培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存

倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养条件与细胞密度)

供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验


二、细胞培养操作指南

收货处理:

冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基混匀离心

培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡2小时

传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)

传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)

消化方法:

使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)

37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止

注意事项:

避免消化液残留(建议离心后彻底去除)

传代后12小时补充新鲜培养基


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)

细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL

冻存步骤:

离心收集细胞后缓慢加入冻存液重悬

梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期储存

复苏验证:

复苏后48小时检测细胞贴壁率(≥90%)

功能验证:胶原分泌检测(P20代细胞应保持基质生成能力)


四、售后服务承诺

重发标准:

1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)

2. 7天内证实真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告)

3. 细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)

4. STR分型与数据库不匹配

不予重发情形:

1. 未按说明书进行预包被处理导致贴壁失败

2. 使用非推荐生长因子添加剂

3. 未定期传代导致细胞过度老化

4. 未进行定期支原体检测引发交叉污染