一、细胞基本属性
- 细胞名称
大鼠脑微血管内皮细胞永生化（Immortalized Rat Brain Microvascular Endothelial Cells）
- 细胞别称
RBMEC；脑微血管内皮细胞；血脑屏障模型细胞
- 种属来源
大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别
健康大鼠（性别不限，供体筛选无神经系统疾病史）
- 组织来源
脑组织微血管段
- 生长特性
贴壁生长（依赖胶原蛋白包被基质）
- 细胞形态
永生化后保持典型内皮细胞形态，形成单层贴壁生长
- 细胞代数
P5 - P15（经永生化处理，增殖能力稳定）
- 细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基
内皮细胞专用培养基（含5% FBS +内皮生长因子及肝素）
- 培养条件
气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件
无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间
约24 - 48小时（与培养密度及传代频率相关）
- 供应限制
仅限体外研究使用，不可用于活体实验或临床用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面后静置培养箱1小时适应环境
- 传代标准
细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代）
- 传代比例
1:3至1:5（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化30 - 60秒，显微镜下观察细胞边缘卷曲立即终止
- 注意事项
- 避免消化过度影响紧密连接蛋白完整性
- 传代后12小时内避免移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：跨内皮电阻值检测（TEER≥200Ω·cm²）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 72小时内证实微生物污染（需提交污染检测影像）
- 细胞复苏后贴壁率低于80%
- 物种鉴定与承诺不符
- 不予重发情形
- 未按说明书进行胶原包被预处理
- 使用非指定培养基培养超过2代
- 未定期进行支原体检测导致污染扩散
- 液氮储存中断超过24小时
