一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠脂肪干细胞永生化细胞系
- 细胞别称:ADSC - immortalized;脂肪源性间充质干细胞;永生化脂肪干细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体筛选无代谢性疾病史)
- 组织来源:脂肪组织(皮下/内脏脂肪微环境分离)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被)
- 细胞形态:长梭形或成纤维样,高核质比,增殖期呈旋涡状排列
- 细胞代数:P5 - P10(经永生化处理,遗传稳定且增殖能力可控)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(无血清冻存体系)
- 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS+双抗+永生化维持因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖传代密度与培养体系)
- 供应限制:仅限基础研究使用,不可用于体内实验或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入3mL预温培养基轻柔混匀离心
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶-EDTA(含钙镁离子中和剂)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
- 注意事项:
- 避免消化过度(损伤细胞表面标记物CD29/CD44)
- 传代后12小时内避免频繁观察,减少物理扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及糖原保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 3×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,缓慢滴加冻存液重悬
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃1小时→ - 80℃过夜→液氮长期存储
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:成脂/成骨诱导分化能力检测(P6代细胞应保持多向分化潜能)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度监控记录)
- 5日内证实微生物污染(需提供污染检测原始数据)
- 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
- 物种鉴定或永生化标志物表达不符
- 不予重发情形:
- 收货后未立即复苏且超时保存(>48小时)
- 自行更换培养基导致细胞特性改变
- 未按规范进行诱导分化验证实验
- 实验操作不当引发的遗传稳定性问题
(注:本产品经SV40大T抗原转导永生化处理,需遵守生物安全二级实验室操作规范)