一、细胞基本属性
细胞名称：人主动脉瓣膜间质细胞永生化（Immortalized Human Aortic Valve Interstitial Cells）
细胞别称：HAVIC - Im；主动脉瓣膜间质永生化细胞；心脏瓣膜间质细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：成人供体（年龄18 - 60岁，性别均衡筛选，无心血管疾病史）
组织来源：主动脉瓣膜间质组织（经伦理审查合规获取）
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白涂层基质）
细胞形态：长梭形或星状，增殖期可见伪足延伸
细胞代数：P10 - P25（经永生化处理，维持表型稳定性）
细胞规格：1×10⁶ cells/T75培养瓶或1.2mL冻存管（无血清冻存体系）
培养基：ValveStem Medium（含5% FBS+成纤维细胞生长因子及TGF - β抑制剂）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及海藻糖），液氮气相长期保存
增殖能力：稳定倍增时间约36 - 48小时（通过端粒酶活性验证）
应用限制：仅供体外研究，禁止临床移植或转基因动物构建
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管复苏：37℃水浴≤2分钟，离心后重悬于预温培养基
培养瓶运输：酒精消毒后静置4小时再换液，避免机械震荡
传代标准：融合度80% - 90%（每5 - 7天传代，依赖细胞代谢状态）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25%胰酶 - 胶原酶混合消化液（含1mM EDTA）
37℃消化3 - 5分钟，离心后轻柔吹打分散细胞团
注意事项：
基质涂层需提前24小时制备（Ⅰ型胶原浓度≥50μg/cm²）
传代后48小时内避免频繁观察，减少培养箱扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含7.5% DMSO+5%右旋糖酐）
冻存密度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL（离心后保留少量上清）
冻存流程：
程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮气相长期存储
质量控制：
复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法，配套提供检测试剂）
功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P15代细胞维持收缩表型）
遗传稳定性：每季度STR检测（提供16位点比对报告）
四、售后服务承诺
重发保障：
1. 干冰运输全程≤ - 70℃（凭温度记录仪数据申请）
2. 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
3. 细胞复苏存活率低于承诺标准（附视频记录）
4. 永生化标记基因（SV40 LT）表达缺失
免责条款：
1. 未使用指定胶原涂层导致细胞贴壁失败
2. 自行转染或药物处理引发的基因组异常
3. 液氮存储中断超过24小时后的功能异常
4. 未按手册要求进行周期性传代导致的衰老
