一、细胞基本属性
- 细胞名称：人乳腺癌成纤维细胞（永生化）
- 细胞别称：人乳腺癌相关成纤维细胞；永生化乳腺癌CAFs
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：乳腺癌患者（临床样本经伦理审查，供体信息脱敏处理）
- 组织来源：乳腺癌组织基质成纤维细胞
- 生长特性：贴壁生长（依赖纤维连接蛋白或胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或纺锤形，呈典型成纤维细胞样单层排列
- 细胞代数：P5 - P15（经永生化处理，增殖能力稳定）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS + 1%双抗 + 成纤维细胞生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖能力：稳定增殖，传代周期约3 - 4天
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基，接种于预包被培养器皿。
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱平衡2小时后换液。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（贴壁紧密时操作）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA，37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项：避免消化过度导致细胞膜损伤；传代后12小时补加新鲜培养基以促进贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 40%基础培养基 + 50% FBS）
- 冻存密度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存程序：细胞离心后重悬于冻存液，按梯度降温流程：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证：复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）；功能验证包括α - SMA免疫荧光染色及胶原分泌检测。
四、售后服务承诺
- 重发条款
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供冻存管状态及温度记录）
- 72小时内经检测证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
- 复苏存活率低于90%或STR鉴定不符
- 免责情形
- 客户未按推荐条件培养或冻存
- 实验操作不当导致细胞功能异常
- 收货后超72小时未进行复苏操作
- 自行转染或基因编辑导致细胞特性改变
