一、细胞基本属性
细胞名称：永生化小鼠角膜上皮细胞（Immortalized Mouse Corneal Epithelial Cells）
细胞别称：iMCE；小鼠角膜上皮永生化细胞；角膜上皮细胞系
种属来源：小鼠（Mus musculus）
品系来源：C57BL/6（健康成年鼠，无眼部疾病史）
组织来源：角膜上皮层（机械剥离法分离）
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：多边形铺路石样排列，形成紧密单层结构
永生化方法：SV40大T抗原基因转染（经PCR验证）
细胞代数：P5 - P15代（遗传稳定性高，保留原代细胞功能特性）
细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM/F12（含10% FBS+表皮生长因子+胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒复合物）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含7% DMSO及细胞膜稳定剂），液氮长期保存
增殖特性：稳定增殖，接触抑制后进入静止期
供应限制：仅供基础研究使用，禁止临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后，离心去除冻存液，重悬于预温培养基
- 培养瓶：酒精擦拭表面后立即转移至CO₂培养箱，静置4小时再换液
传代标准：融合度达90%-95%（建议每5 - 7天传代一次）
传代比例：1:3至1:4（推荐初始接种密度1×10^4 cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项：
- 传代前需用PBS充分清洗去除钙离子（避免消化不完全）
- 首次传代后48小时内避免频繁观察（减少机械扰动）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无动物源冻存液（含7% DMSO+海藻糖保护剂）
细胞密度：推荐冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤：
- 对数生长期细胞经消化离心后重悬于冻存液
- 程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃专用冻存盒过夜→液氮长期储存
复苏验证：
- 复苏后贴壁率≥85%（台盼蓝染色法检测）
- 功能验证：细胞划痕实验（24小时迁移修复率≥70%）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 物流监控显示干冰耗尽导致细胞失活
2. 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
3. 复苏后活率低于80%（需提供染色视频）
4. 永生化基因插入位点验证不符
免责条款：
1. 客户自行更换培养基成分导致功能异常
2. 未使用胶原包被培养皿引发的贴壁失败
3. 实验操作污染导致细胞状态恶化
4. 超代次使用（P15代后）引发的遗传偏移
注：本产品经STR鉴定及角蛋白KRT12免疫荧光验证，适用于角膜损伤修复机制研究、眼表药物毒性测试及基因编辑模型构建等科研领域。
