一、细胞基本属性
细胞名称：鸡气管黏膜上皮细胞永生化（Immortalized Chicken Tracheal Mucosal Epithelial Cells）
细胞别称：iCTMEC；永生化气管上皮细胞；鸡气管黏膜细胞
种属来源：鸡（Gallus gallus）
年龄性别：健康成年鸡（性别不限，供体筛选无呼吸道感染史）
组织来源：气管黏膜上皮层
生长特性：贴壁生长（需经胶原包被培养器皿）
细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈多角形或扁平鳞状
细胞代数：P5 - P15（经永生化处理，增殖能力稳定且遗传背景一致）
细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：Epithelial Cell Medium（含1% FBS + 上皮细胞特异性生长因子）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存（-196℃）
倍增时间：约24 - 48小时（依赖传代密度及培养条件）
供应限制：仅限体外研究使用，不可用于临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱平衡1小时再操作
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞完全脱离
注意事项：
- 避免消化时间过长（防止细胞膜完整性受损）
- 首次换液需在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
细胞密度：推荐冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 消化后离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证：
- 复苏后12小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：黏液分泌基因表达检测（qPCR验证MUC5AC表达水平）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 收货后48小时内证实微生物污染（需提供检测报告）
3. 复苏后细胞存活率低于85%（按规范操作复测）
4. 永生化标志物检测与描述不符（如SV40 T抗原表达缺失）
不予重发情形：
1. 未按说明书要求进行胶原包被培养
2. 使用非指定培养基导致功能异常
3. 反复冻融或超低温保存不规范
4. 未执行污染监测直接用于共培养实验
