一、细胞基本属性
1. 细胞名称：大鼠毛囊干细胞永生化细胞（Rat Hair Follicle Stem Cells, Immortalized）
2. 细胞别称：RFSC；毛囊干细胞；永生化毛囊干细胞
3. 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
4. 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体经SPF级环境饲养）
5. 组织来源：毛囊组织（分离自触须毛囊隆突区）
6. 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被基质）
7. 细胞形态：梭形或多角形，高核质比，成簇生长
8. 细胞代数：P5 - P15（经永生化处理，稳定传代超过20代）
9. 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：DMEM/F12基础培养基（含10% FBS + 表皮生长因子 + 成纤维细胞生长因子）
11. 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及海藻糖保护剂）， - 150℃液氮长期保存
13. 倍增时间：~36 - 48小时（依赖生长因子浓度）
14. 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于活体移植或药物开发
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒外壁，静置培养箱4小时待细胞贴壁
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
3. 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞悬浮
5. 注意事项
- 避免机械力损伤（吹打次数≤5次）
- 传代后12小时补充5ng/mL EGF增强增殖活性
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO+10%蔗糖）
2. 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 消化后离心去上清，轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30min→ - 80℃ 24h→液氮长期储存
4. 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率（≥85%）
- 功能验证：克隆形成实验（P8代细胞应保持>70%克隆形成效率）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度记录异常（需提供物流温度监控截图）
- 到货72小时内证实真菌/支原体污染（需提供第三方检测报告）
- 细胞复苏后存活率低于80%（台盼蓝染色法）
- 永生化标记基因PCR验证未通过
2. 不予重发情形
- 未按推荐流程进行细胞复苏（如直接室温解冻）
- 擅自改用无生长因子培养基导致细胞分化
- 多次冻融操作（≥2次）造成细胞损伤
- 未进行STR比对即用于发表数据
