一、细胞基本属性
- 细胞名称：鸡骨骼肌细胞永生化（Immortalized Chicken Skeletal Muscle Cells）
- 细胞别称：CK - SkM；永生化鸡肌细胞；鸡骨骼肌成肌细胞
- 种属来源：鸡（Gallus gallus）
- 年龄性别：胚胎或成体鸡（性别不限，供体筛选无肌营养不良病史）
- 组织来源：骨骼肌组织（经无菌分离及永生化处理）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被基质）
- 细胞形态：长梭形或多核管状结构（融合后呈现肌管分化倾向）
- 细胞代数：P10 - P20（永生化特性确保长期传代稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：骨骼肌细胞专用培养基（含10% FBS + 成肌因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖血清浓度及生长因子刺激）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于疫苗生产或生物医药转化研究
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱2小时平衡后换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞脱离基质
- 注意事项：
- 避免过度消化（永生化细胞对酶敏感，易损伤肌节蛋白）
- 传代后12小时内避免频繁观察，减少机械扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后重悬于预冷冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30min→ - 20℃ 2h→ - 80℃ 24h→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：肌管分化能力（诱导7天后表达Myosin重链）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 5天内证实支原体污染（需提供荧光定量PCR结果）
- 细胞永生化标志物（如SV40大T抗原）表达缺失
- 物种鉴定与承诺不符（COI基因序列比对差异）
- 不予重发情形：
- 未使用配套培养基导致肌管分化失败
- 未按规范进行胶原包被直接接种
- 自行改造细胞基因组引发的功能异常
- 液氮保存中断导致的复苏失败
（注：以上内容严格遵循科研伦理规范，永生化处理符合实验室生物安全二级标准）
