一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠结肠黏膜上皮细胞永生化系（Immortalized Mouse Colonic Mucosal Epithelial Cells）
- 细胞别称：iMCMEC；永生化结肠上皮细胞；结肠黏膜细胞系
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（雌雄不限，无肠道疾病史）
- 组织来源：结肠黏膜层（经机械分离与酶消化法提取）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：单层“铺路石样”排列，接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数：P5 - P15（经永生化处理，遗传稳定性通过STR验证）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Epithelial Cell Medium（含5% FBS+上皮细胞生长因子+永生化维持因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约36 - 48小时（与细胞密度及培养条件相关）
- 应用范围：肠道屏障功能研究、炎症模型构建、药物转运实验（仅限科研使用）
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：表面消毒后直接置于37℃培养箱平衡1小时
- 传代标准：融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:4（建议初始接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液）
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍培养瓶至细胞层脱落
- 关键提示
- 消化后立即加入含血清培养基终止反应
- 传代后12小时更换新鲜培养基以清除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS+渗透保护剂）
- 冻存密度：1×10^6 cells/mL（离心后重悬于冻存液）
- 冻存程序：梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃ 12小时 → 液氮储存
- 质检要求
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：ZO - 1免疫荧光染色确认紧密连接完整性
四、售后服务承诺
- 质量保障
- 干冰运输异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货7天内检测出支原体污染（附第三方检测报告）
- 细胞复苏后活力＜85%（经视频验证操作流程）
- 永生化标记基因PCR检测结果不符
- 免责条款
- 客户未按规范进行预包被培养器皿处理
- 使用非指定培养基导致细胞去分化
- 擅自进行基因编辑后引发的功能异常
- 未保留传代记录导致无法追溯细胞状态
